嗜肺軍團(tuán)菌PCR試劑盒

legionella pneumophila

產(chǎn)品及特點

嗜肺軍團(tuán)菌（legionella pneumophila）是一種有鞭毛，革蘭氏陰性，軍團(tuán) 菌屬多形態(tài)性的短小球桿菌。為胞內(nèi)寄生菌。嗜肺軍團(tuán)菌引起軍團(tuán)病，該病流 行于夏秋季，主要通過吸入帶菌飛沫而感染。常見的感染來源為污染的空調(diào)和 供水系統(tǒng)。軍團(tuán)病主要有流感樣型和肺炎型兩種臨床類型，流感樣型愈后良好， 肺炎型死亡率較高（大于 15%）。因此對嗜肺軍團(tuán)菌進(jìn)行快速靈敏的診斷具有 重要的意義。本產(chǎn)品就是為此目的根據(jù) PCR 原理開發(fā)的產(chǎn)品，它具有下列特點：

1.即開即用，用戶只需要提供細(xì)菌DNA模板。
2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)增嗜肺軍團(tuán)菌，但跟其他細(xì)菌無交叉 反應(yīng)。
3.提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。
4.PCR mix中含上樣染料，PCR后可以直接上樣電泳。
5.本試劑盒足夠做40μL體系的PCR 50次。
6.本產(chǎn)品只能用于科研。

嗜肺軍團(tuán)菌PCR試劑盒規(guī)格及成分

運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置，不要污染其 他試劑。 

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個樣品，必須設(shè)置 N+2 個提取，多出的一個是 PC（樣品制備陽 性對照），一個是 NC（樣品制備陰性對照）。可以用 10μL 陽性對照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此 作為 PC。另外用水作為 NC。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)寄生蟲 DNA 提取 試劑盒兼容。 

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照，故需要設(shè)置 N+4 個反應(yīng)。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴(kuò)增，否則實 驗無效。對沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。