人類嗜T淋巴細(xì)胞病毒1型前病毒PCR試劑盒

Human T-cell Lymphoma Virus Provirus(HTLV-1)

產(chǎn)品及特點(diǎn)

人類嗜 T 淋巴細(xì)胞病毒１型（Human T-lymphotropic Virus 1,HTLV-1）是一 種感染后可導(dǎo)致血癌或其他轉(zhuǎn)移癌的 RNA 病毒，在體內(nèi)主要感染 CD4+ T 淋巴細(xì)胞， 可引起成人 T 淋巴細(xì)胞白血病/淋巴瘤、HTLV-Ⅰ相關(guān)脊髓?。℉TLV-Ⅰassociated myelopathy，HAM/熱帶痙攣性下肢癱，tropical spastic paraparesis TSP）及色 素層炎（uveitis），主要通過輸血、針頭、性行為、母子傳染。HTLV-I 病毒是愛滋病 毒 (HTLV-I) 的遠(yuǎn)親，但 HTLV-I 和愛滋病的發(fā)生沒有任何關(guān)連。目前各捐血中心以 酵素免疫法全面篩檢 HTLV-I 病毒。

患者的白血病細(xì)胞內(nèi)有 HTLV 前病毒 DNA 的整合，所以 HTLV-１前病毒 DNA 水 平可以作為病毒載量之外的另一標(biāo)志物。本產(chǎn)品就是針對(duì)此需求而建立的一種檢測(cè) HTLV-１前病毒 DNA 的 PCR 檢測(cè)方法，本試劑盒具有下列特點(diǎn)： 

1. 根據(jù) HTLV-1 PX 基因設(shè)計(jì)的針對(duì) HTLV-1 前病毒的 PCR 引物，專一性強(qiáng)。

2. 即開即用，用戶只需要提供樣品模板，操作簡(jiǎn)單，定量準(zhǔn)確快速。

3. 試劑盒有陽性對(duì)照，別于區(qū)分真假陽性。

4. 本試劑盒足夠 50 次 40uL 反應(yīng)體系的常規(guī) PCR。

5. 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。 

人類嗜T淋巴細(xì)胞病毒1型前病毒PCR試劑盒規(guī)格及成分

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對(duì)照需要單獨(dú)放置，不要污染其 他試劑。 

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個(gè)樣品，必須設(shè)置 N+2 個(gè)提取，多出的一個(gè)是 PC（樣品制備陽 性對(duì)照），一個(gè)是 NC（樣品制備陰性對(duì)照）?？梢杂?10μL 陽性對(duì)照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此 作為 PC。另外用水作為 NC。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)寄生蟲 DNA 提取 試劑盒兼容。 

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對(duì) N+2 個(gè)樣品，在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽性對(duì)照和一個(gè) PCR 陰性 對(duì)照，故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下列 PCR 參數(shù)進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增：

三、電泳檢測(cè)

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測(cè) PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽 性對(duì)照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對(duì)照必須無任何擴(kuò)增，否則實(shí) 驗(yàn)無效。對(duì)沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。