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人副流感病毒2型RT-PCR試劑盒

人副流感病毒2型RT-PCR試劑盒是群中等小的雙股 DNA 病毒,根據其理化性質分 α、β、γ、未分類皰疹病毒四個亞科。皰疹病毒感染的宿主范圍廣泛,可感染人類和其他脊椎動物。在自然界廣泛存在,主要侵犯外胚層發(fā)育而成的組織,例如:皮膚、粘膜和神經組織。

  • 產品型號:50次
  • 廠商性質:生產廠家
  • 更新時間:2020-08-03
  • 訪  問  量:429
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詳細介紹
品牌其他品牌貨號XY-0406
規(guī)格50T供貨周期一周
主要用途熒光定量PCR具有更高的擴增效率、更高的擴增靈敏度、更高的擴增特異性。應用領域醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產業(yè),農林牧漁

人副流感病毒2型RT-PCR試劑盒

Human Parainfluenza Virus 2(HPIV-2)

產品及特點

人副流感病毒(Human Parainfluenza Virus,HPIV)常常引起兒童下呼 吸道感染的一種病毒,其致病性僅次于呼吸道合胞病毒 (RSV)。與 RSV 一樣, 人類副流感病毒可以造成反復發(fā)作的上呼吸道感染(如感冒和喉嚨痛)。它也能 造成嚴重的反復感染的下呼吸道疾?。ㄈ绶窝祝夤苎缀图氈夤苎祝?,特別 是在老年人中和有免疫缺陷人群中。人類副流感病毒的四種亞型各有不同的臨床 和流行病學特征。I 型和 II 型的典型的臨床特征是造成兒童喉氣管支氣管炎, I 型是這種兒童喉氣管支氣管炎的主要原因,而 II 型次之。I 型和 II 型均能造 成其它的上呼吸道和下呼吸道疾病。本產品是根據 PCR 原理開發(fā)的人副流感病毒 2 型檢測的試劑盒。它具有下列特點:

1. 一站式,用于不需要單獨準備每種成分,包括引物和對照。

2. 根據人副流感病毒 2 型的保守基因序列設計的引物,具有良好的特異性。

3. 靈敏度可以達到 1000 拷貝/反應。

4. 使用一管式 RT-PCR 技術,RT 和 PCR 兩步在一個試管內完成,不需要中間 轉移樣品,降低了操作誤差和可能的污染。

5. 本產品足夠 50 次 20μL 體系的 RT-PCR。

6. 本產品只能用于科研,不能用于臨床。

人副流感病毒2型RT-PCR試劑盒規(guī)格及成分

編號

成  份

規(guī)格

試劑一

5×雙酶一管式 RT-PCR Buffer

200 μL(橘黃蓋)

試劑二

MMLV-Taq Mix

75 μL(紅蓋)

試劑三

超純水 

1 mL(亮黃蓋)

試劑四

人副流感病毒 2 型 RT-PCR 引物混合液 

100 μL(白蓋)

試劑五

人副流感病毒 2 型 RT-PCR 陽性對照(1×10E8 拷貝/μL)

50 μL(黃蓋)

試劑六

使用手冊 

1 份

運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為 12 個月。收到貨后陽性對照需要跟其他成分 分開放置,因為其容易污染其他成分,造成假陽性。 

自備試劑 樣品 RNA

使用方法 一、樣品 RNA 的制備

1. 如果有 N 個樣品,必須設置 N+2 個提取,多出的一個是 PC(樣品制備陽性 對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?10μL 流行性出血熱病毒 PCR 陽性對照的 100 倍稀釋作為制備的陽性對照;用水作為制備的陰性對照。 制備所得成為樣品 RNA。

2. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 RNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒 RNA 提 取試劑盒兼容。

二、設置 RT-PCR 反應(20μL 體系)

3. 如果有 N+2 個樣品,則標記 N+4 個 PCR 管(額外增加的兩個管一個是 RT-PCR 陽性對照,另一個是 RT-PCR 陰性對照)并按照下表在 PCR 管中 加入下列成分:

成分

樣品

陽性對照

陰性對照

5×雙酶一管式 RT-PCR Buffer

各 4 μL

4 μL

4 μL

人副流感病毒 2 型 RT-PCR 引物 混合液

2μL

2μL

2μL

N+2 個制備的 RNA 樣品

各12.5 μL

 

 

超純水 

 

12.5 μL

 

人副流感病毒 2 型 RT-PCR 陽性 對照的 10000 倍稀釋液

 L

 

12.5 μL

 MMLV-Taq Mix 1.5 μL  1.5 μL 1.5 μL

4. 上機進行 RT-PCR,RT-PCR 反應參數為:

過程

溫度

時間

逆轉錄 

42℃

30 min

預變性

95℃  

5 min

PCR 反應 (35 個循環(huán))

95℃ 

30 sec

55℃ 

30 sec

72

20 sec

 延伸  72 7 min

5. 瓊脂糖電泳檢測擴增效果。如果陰性對照有擴增產物或陽性對照無擴增產物, 則說明實驗失敗,需要分析實驗失敗的原因。只有在陰性對照沒有擴增產物、 陽性對照有 122bp 預期的擴增產物的情況下,才有必要分析樣品的實驗結果, 如果有擴增產物則為陽性,如果無則為陰性。

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