HIV-1前病毒PCR試劑盒

HIV-1前病毒PCR試劑盒是群中等小的雙股 DNA 病毒，根據(jù)其理化性質分 α、β、γ、未分類皰疹病毒四個亞科。皰疹病毒感染的宿主范圍廣泛，可感染人類和其他脊椎動物。在自然界廣泛存在，主要侵犯外胚層發(fā)育而成的組織，例如：皮膚、粘膜和神經(jīng)組織。

產(chǎn)品型號：50次
廠商性質：生產(chǎn)廠家
更新時間：2020-08-03
訪問量：458

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詳細介紹

品牌	其他品牌	貨號	XY-0379
規(guī)格	50T	供貨周期	一周
主要用途	熒光定量PCR具有更高的擴增效率、更高的擴增靈敏度、更高的擴增特異性。	應用領域	醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁

HIV-1前病毒PCR試劑盒

HIV-1 Provirus HIV-1

產(chǎn)品及特點

人類免疫缺陷病毒１型（HIV-１）患者血漿中病毒 RNA 水平一直以來是評判抗病毒治療效果或預測疾病進展的重要指標。但是，經(jīng)抗病毒治療后血漿 HIV-１RNA 已達到基線水平感染者的血液、精液或淋巴結中仍可以檢測到 HIV-１原病毒 DNA 的存在，構成病毒儲藏庫，對清除 HIV-１病毒構成嚴重阻礙。所以在病毒載量已經(jīng)檢測不到的情況下，HIV-１原病毒 DNA 水平可以作為除 CD4+Ｔ細胞計數(shù)和病毒載量之外的另一標志物。本產(chǎn)品就是針對此需求而建立的一種檢測 HIV-１原病毒 DNA 的 PCR 檢測方法，該種方法還可用于 HIV-１病毒儲藏庫中 HIV-１原病毒 DNA 的檢測。本試劑盒具有下列特點：

1. 根據(jù) HIV-1 LTR 基因設計的針對 HIV-1 原病毒的 PCR 引物，專一性強。

2. 即開即用，用戶只需要提供樣品模板，操作簡單，定量準確快速。

3. 試劑盒有陽性對照，別于區(qū)分真假陽性。

4. 本試劑盒足夠 50 次 40μL 反應體系的常規(guī) PCR。

5. 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

HIV-1前病毒PCR試劑盒規(guī)格及成分

編號	成分	規(guī)格
試劑一	2×PCR MagicMix 3.0	1 mL（紅蓋）
試劑二	超純水	1 mL（本色蓋）
試劑三	HIV-1 前病毒 PCR 引物混合液	100 μL（白蓋）
試劑四	HIV-1 前病毒 PCR 陽性對照	50 μL（黃蓋）
試劑五	天凈沙DNA釋放劑試用裝	50次（試用裝）
試劑六	使用手冊	1 份

運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。

自備試劑樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個樣品，必須設置 N+2 個提取，多出的一個是 PC（樣品制備陽性對照），一個是 NC（樣品制備陰性對照）。可以用 10μL 陽性對照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為 PC。另外用水作為 NC。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)寄生蟲 DNA 提取試劑盒兼容。

二、設置 PCR 反應（40μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性對照，故需要設置 N+4 個反應。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分：

成分	N+2個樣品管	PCR陰性對照	PCR陽性對照
PCR MagicMix 3.0	各20 μL	20 μL	20 μL
HIV-1 前病毒 PCR 引物混合液	各2 μL	2 μL	2 μL
N+2 個樣品（包括 PC 和 NC）	各18 μL	-	-
超純水	-	18 μL	-
PCR 陽性對照 10000 倍稀釋液	-	-	18 μL

4. 按下列 PCR 參數(shù)進行 PCR 擴增：

過程	溫度	時間
預變性	95℃	5 min
PCR反應（35個循環(huán)）	94℃	30 秒
	53℃	30 秒
	72℃	45 秒
后延伸	72℃	10 分鐘

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在擴增結束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴增，否則實驗無效。對沒有擴增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。

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