庚型肝炎病毒PCR試劑盒

Hepatitis G Virus(HGV)

產(chǎn)品及特點(diǎn)

庚型肝炎病毒(Hepatitis G Virus，HGV)會(huì)引發(fā)肝炎，和乙型肝炎病毒相 似，主要經(jīng)輸血等非腸道途徑傳播，也可存在母-嬰傳播和醫(yī)源性傳播。單獨(dú)感 染時(shí)臨床癥狀不明顯，一般不損害肝臟。主要特征有：過(guò)性病毒血癥呈隱性感 染；急性肝炎 ALT 升高，黃疸比急性丙肝輕，多數(shù)很快恢復(fù)可與乙、丙肝病毒 合并感染；病毒持續(xù)存在病毒始終處于低滴度狀態(tài)，少數(shù)高滴變，但常無(wú)臨床 癥狀；病情遷延隨著病毒滴度的波動(dòng)，ALT 間歇性增高，少數(shù)反復(fù)發(fā)作轉(zhuǎn)成慢 性肝炎；可能引起暴發(fā)性肝炎以亞急性重型肝炎多見(jiàn)；肝硬化感染病毒后演變 成肝硬化需較長(zhǎng)時(shí)間，一旦硬化，病情即急轉(zhuǎn)直下，發(fā)展迅速；肝癌少數(shù)換者 也可發(fā)展成肝癌，與乙、丙肝病毒有協(xié)同作用。該病毒對(duì)人體生命健康造成嚴(yán) 重?fù)p害，因此快速靈敏檢測(cè)庚型肝炎病毒具有重要意義。本產(chǎn)品就是根據(jù)庚型 肝炎病毒保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品，它具有下列特 點(diǎn)：

1. 即開(kāi)即用，只需要提供病毒 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化，專(zhuān)一性強(qiáng)，只擴(kuò)增庚型肝炎病毒，與其他病原沒(méi)有交 叉反應(yīng)。

3. 提供陽(yáng)性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次。

6. 本產(chǎn)品只能用于科研。 

庚型肝炎病毒PCR試劑盒規(guī)格及成分

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽(yáng)性對(duì)照需要單獨(dú)放置，不要污染其 他試劑。 

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個(gè)樣品，必須設(shè)置 N+2 個(gè)提取，多出的一個(gè)是 PC（樣品制備陽(yáng) 性對(duì)照），一個(gè)是 NC（樣品制備陰性對(duì)照）?？梢杂?10μL 陽(yáng)性對(duì)照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此 作為 PC。另外用水作為 NC。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)寄生蟲(chóng) DNA 提取 試劑盒兼容。 

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對(duì) N+2 個(gè)樣品，在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽(yáng)性對(duì)照和一個(gè) PCR 陰性 對(duì)照，故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

三、電泳檢測(cè)

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測(cè) PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽(yáng) 性對(duì)照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對(duì)照必須無(wú)任何擴(kuò)增，否則實(shí) 驗(yàn)無(wú)效。對(duì)沒(méi)有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。