土拉熱弗朗西斯菌PCR試劑盒

土拉熱弗朗西斯菌PCR試劑盒是群中等小的雙股 DNA 病毒，根據(jù)其理化性質(zhì)分 α、β、γ、未分類皰疹病毒四個亞科。皰疹病毒感染的宿主范圍廣泛，可感染人類和其他脊椎動物。在自然界廣泛存在，主要侵犯外胚層發(fā)育而成的組織，例如：皮膚、粘膜和神經(jīng)組織。

產(chǎn)品型號：50次
廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
更新時間：2020-08-03
訪問量：470

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詳細(xì)介紹

品牌	其他品牌	貨號	XY-0330
規(guī)格	50T	供貨周期	一周
主要用途	熒光定量PCR具有更高的擴(kuò)增效率、更高的擴(kuò)增靈敏度、更高的擴(kuò)增特異性。	應(yīng)用領(lǐng)域	醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁

土拉熱弗朗西斯菌PCR試劑盒

Francisella tularensis

產(chǎn)品及特點

土拉熱弗朗西斯菌（Francisella tularensis）會引起土拉桿菌病，又稱野兔熱，是一種自然疫源性疾病，主要感染野生嚙齒動物并可傳染給其他動物和人類。感染后的主要表現(xiàn)為體溫升高，肝、脾、腎腫大，充血和多發(fā)性粟粒壞死，淋巴結(jié)腫大，并有針尖大干酪樣壞死灶，該疾病的傳播會給養(yǎng)殖業(yè)帶來較大的經(jīng)濟(jì)損失，因此快速檢測具有重要意義。本試劑盒根據(jù) PCR 原理開發(fā)，它具有下列特點：

1. 即開即用，用戶只需要提供病毒 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)增土拉熱弗朗西斯菌.

3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研。

土拉熱弗朗西斯菌PCR試劑盒規(guī)格及成分

編號	成分	規(guī)格
試劑一	2×PCR MagicMix	1 mL（紅蓋）
試劑二	超純水	1 mL（亮黃色）
試劑三	土拉熱弗朗西斯菌 PCR 引物混合物	100 μL（白蓋）
試劑四	土拉熱弗朗西斯菌 PCR 陽性對照（1×10E8 拷貝/μL）	50 μL（黃蓋）
試劑五	天凈沙核酸釋放劑	20 次（1mL，綠蓋））
試劑六	使用手冊	1 份

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置，不要污染其他試劑。

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法一、樣品 DNA 的制備

1. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼容。

2. 如果有 N 個樣品，則需要做 N+2 個提取，包括一個樣品制備陽性對照和一個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水（取決于試劑盒要求的樣品起始量）中加 10μL 斑點叉尾鮰病毒 PCR 陽性對照的 1 萬倍稀釋液而得，樣品制備陰性對照是直接用水。提取結(jié)束后后得到模板 DNA 放冰上待用。

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性對照，故需要設(shè)置 N+4 個反應(yīng)。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分：

成分	N+2 個樣品管	PCR 陰性對照	PCR 陽性對照
PCR MagicMix 3.0	各 20 μL	20 μL	20 μL
土拉熱弗朗西斯菌 PCR 引物混合液	各2 μL	2 μL	各 2 μL
N+2 個樣品 DNA 模板	各 18 μL
PCR 陰性對照（水）		18 μL
PCR 陽性對照（土拉熱弗朗西斯菌 PCR 陽性對照的 1 萬倍稀釋液）			18 μL

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

過程	溫度	時間
預(yù)變性	95℃	5 min
PCR 反應(yīng) （35 個循環(huán)）	95℃	15 sec
	55℃	15 sec
	72℃	10 sec
后延伸	72℃	10 min

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。陽性對照必須有條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴(kuò)增，否則實驗無效。對沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染

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