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2015-08-28 2016-02-16 2015-09-07 2015-02-27 2015-08-19 
乙型腦炎（乙腦）病毒RT-PCR試劑盒是群中等小的雙股 DNA 病毒，根據其理化性質分 α、β、γ、未分類皰疹病毒四個亞科。皰疹病毒感染的宿主范圍廣泛，可感染人類和其他脊椎動物。在自然界廣泛存在，主要侵犯外胚層發(fā)育而成的組織，例如：皮膚、粘膜和神經組織。
產品型號：50次廠商性質：生產廠家更新時間：2020-07-31訪 問 量：516
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| 品牌 | 其他品牌 | 貨號 | XY-0281 |
|---|---|---|---|
| 規(guī)格 | 50T | 供貨周期 | 一周 |
| 主要用途 | 熒光定量PCR具有更高的擴增效率、更高的擴增靈敏度、更高的擴增特異性。 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產業(yè),農林牧漁 |
乙型腦炎（乙腦）病毒RT-PCR試劑盒
Epidemic Encephalitis B
產品及特點
乙型腦炎病毒(Epidemic Encephalitis B)是一種 RNA 病毒，也是流行性乙 型腦炎的病原體，在低溫條件下，該病毒能自下而上較長時間，在動物、雞胚及 組織培養(yǎng)細胞中均能增殖。幼豬是乙腦病毒的主要傳染源和中間宿主，蚊子是乙 腦病毒的傳播媒介。當人受帶病毒的蚊子叮咬后，乙腦病毒進入人體，在血管內 皮細胞、淋巴結、肝、脾等吞噬細胞內增殖，并血液循環(huán)到達腦部而引起炎癥。 本產品根據 PCR 原理開發(fā)，可用于科研領域快速檢測乙型腦炎（乙腦）病毒。 它具有下列特點：
1. 一站式，用于不需要單獨準備每種成分，包括引物和對照。
2. 根據乙型腦炎（乙腦）病毒的保守基因序列設計的引物，具有良好的特異性。
3. 靈敏度可以達到 1000 拷貝/反應。
4. 使用一管式 RT-PCR 技術，RT 和 PCR 兩步在一個試管內完成，不需要中間 轉移樣品，降低了操作誤差和可能的污染。
5. 本產品足夠 50 次 20μL 體系的 RT-PCR。
6. 本產品只能用于科研，不能用于臨床。
乙型腦炎（乙腦）病毒RT-PCR試劑盒規(guī)格及成分
| 編號 | 成 份 | 規(guī)格 |
| 試劑一 | 5×雙酶一管式 RT-PCR Buffer | 200 μL（橘黃蓋） |
| 試劑二 | MMLV-Taq Mix | 75 μL（紅蓋） |
| 試劑三 | 超純水 | 1 mL（亮黃蓋） |
| 試劑四 | 乙型腦炎（乙腦）病毒 RT-PCR 引物 混合液 | 100 μL（白蓋） |
| 試劑五 | 乙型腦炎（乙腦）病毒 RT-PCR 陽性 對照（1×10E8 拷貝/μL） | 50 μL（黃蓋） |
| 試劑六 | 天凈沙核酸釋放劑（試用裝） | 20 次（1mL，綠蓋） |
| 試劑七 | 使用手冊 | 1 份） |
運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，保存期限為 12 個月。收到貨后陽性對照需要跟其他成分 分開放置，因為其容易污染其他成分，造成假陽性。
自備試劑 樣品 RNA
使用方法 一、樣品 RNA 的制備
1. 如果有 N 個樣品，必須設置 N+2 個提取，多出的一個是 PC（樣品制備陽性 對照），一個是 NC（樣品制備陰性對照）。可以用 10μL 流行性出血熱病毒 PCR 陽性對照的 100 倍稀釋作為制備的陽性對照；用水作為制備的陰性對照。 制備所得成為樣品 RNA。
2. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 RNA，本試劑盒跟市場上大多數病毒 RNA 提 取試劑盒兼容。
二、設置 RT-PCR 反應（20μL 體系）
3. 如果有 N+2 個樣品，則標記 N+4 個 PCR 管（額外增加的兩個管一個是 RT-PCR 陽性對照，另一個是 RT-PCR 陰性對照）并按照下表在 PCR 管中 加入下列成分：
成分 | 樣品 | 陽性對照 | 陰性對照 |
5×雙酶一管式 RT-PCR Buffer | 各 4 μL | 4 μL | 4 μL |
乙型腦炎（乙腦）病毒 RT-PCR 引物混合液 | 各2μL | 2μL | 2μL |
N+2 個制備的 RNA 樣品 | 各12.5 μL |
|
|
超純水 |
| 12.5 μL |
|
乙型腦炎（乙腦）病毒 RT-PCR 陽性對照 的 100 倍稀釋液 | L |
| 12.5 μL |
| MMLV-Taq Mix | 1.5 μL | 1.5 μL | 1.5 μL |
4. 上機進行 RT-PCR，RT-PCR 反應參數為:
過程 | 溫度 | 時間 |
逆轉錄 | 42℃ | 30 min |
預變性 | 95℃ | 5 min |
PCR 反應 （35 個循環(huán)） | 95℃ | 30 sec |
55℃ | 30 sec | |
72℃ | 30 sec | |
| 延伸 | 72℃ | 7 min |
5. 瓊脂糖電泳檢測擴增效果。如果陰性對照有擴增產物或陽性對照無擴增產物， 則說明實驗失敗，需要分析實驗失敗的原因。只有在陰性對照沒有擴增產物、 陽性對照有 122bp 預期的擴增產物的情況下，才有必要分析樣品的實驗結果， 如果有擴增產物則為陽性，如果無則為陰性。
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