?？刹《綬T-PCR試劑盒

?？刹《綬T-PCR試劑盒是群中等小的雙股 DNA 病毒，根據(jù)其理化性質(zhì)分 α、β、γ、未分類皰疹病毒四個亞科。皰疹病毒感染的宿主范圍廣泛，可感染人類和其他脊椎動物。在自然界廣泛存在，主要侵犯外胚層發(fā)育而成的組織，例如：皮膚、粘膜和神經(jīng)組織。

產(chǎn)品型號：50次
廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
更新時間：2020-07-30
訪問量：475

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詳細介紹

品牌	其他品牌	貨號	XY-0260
規(guī)格	50T	供貨周期	一周
主要用途	熒光定量PCR具有更高的擴增效率、更高的擴增靈敏度、更高的擴增特異性。	應用領域	醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁

?？刹《綬T-PCR試劑盒

ECHO Virus

產(chǎn)品及特點

?？刹《荆‥CHO Virus）是一種 RNA 病毒，只對人類有感染性，多發(fā)于夏、秋季，絕大多數(shù)是隱性感染。病毒感染的臨床表現(xiàn)類似于風疹，孕季感染雖可累及胎兒，但很少引起畸形，常見的癥狀為上呼吸道感染、發(fā)燒、非化膿性腦膜炎和皮疹，皮疹為斑丘疹或麻疹樣皮疹，持續(xù) 1-3 天自然消退。因此靈敏快捷的診斷產(chǎn)品具有重要的意義。本產(chǎn)品根據(jù) PCR 原理開發(fā)，可用于科研領域快速檢測?？刹《?。它具有下列特點：

1. 一站式，用于不需要單獨準備每種成分，包括引物和對照。

2. 根據(jù)?？刹《镜谋Ｊ鼗蛐蛄性O計的引物，具有良好的特異性。

3. 靈敏度可以達到 1000 拷貝/反應。

4. 使用一管式 RT-PCR 技術(shù)，RT 和 PCR 兩步在一個試管內(nèi)完成，不需要中間轉(zhuǎn)移樣品，降低了操作誤差和可能的污染。

5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的 RT-PCR。

6. 本產(chǎn)品只能用于科研，不能用于臨床。

?？刹《綬T-PCR試劑盒規(guī)格及成分

編號	成份	規(guī)格
試劑一	5×雙酶一管式 RT-PCR Buffer	200 μL（橘黃蓋）
試劑二	MMLV-Taq Mix	75 μL（紅蓋）
試劑三	超純水	1 mL（亮黃蓋）
試劑四	?？刹《?RT-PCR 引物混合液	100 μL（白蓋）
試劑五	?？刹《?RT-PCR 陽性對照（1×10E8 拷貝/μL）	50 μL（黃蓋）
試劑六	天凈沙核酸釋放劑（試用裝）	20 次（1mL，綠蓋）
試劑七	使用手冊	1 份）

運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，保存期限為 12 個月。收到貨后陽性對照需要跟其他成分分開放置，因為其容易污染其他成分，造成假陽性。

自備試劑 樣品 RNA

使用方法 一、樣品 RNA 的制備

1. 如果有 N 個樣品，必須設置 N+2 個提取，多出的一個是 PC（樣品制備陽性對照），一個是 NC（樣品制備陰性對照）?？梢杂?10μL 流行性出血熱病毒 PCR 陽性對照的 100 倍稀釋作為制備的陽性對照；用水作為制備的陰性對照。制備所得成為樣品 RNA。

2. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 RNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 RNA 提取試劑盒兼容。

二、設置 RT-PCR 反應（20μL 體系）

3. 如果有 N+2 個樣品，則標記 N+4 個 PCR 管（額外增加的兩個管一個是 RT-PCR 陽性對照，另一個是 RT-PCR 陰性對照）并按照下表在 PCR 管中加入下列成分：

成分	樣品	陽性對照	陰性對照
5×雙酶一管式 RT-PCR Buffer	各 4 μL	4 μL	4 μL
?？刹《?RT-PCR 引物混合液	各2μL	2μL	2μL
N+2 個制備的 RNA 樣品	各12.5 μL
超純水		12.5 μL
?？刹《?RT-PCR 陽性對照的 100 倍稀釋液	L		12.5 μL
MMLV-Taq Mix	1.5 μL	1.5 μL	1.5 μL

4. 上機進行 RT-PCR，RT-PCR 反應參數(shù)為:

過程	溫度	時間
逆轉(zhuǎn)錄	42℃	30 min
預變性	95℃	5 min
PCR 反應（35 個循環(huán)）	95℃	30 sec
	59℃	30 sec
	72℃	30 sec
延伸	72℃	7 min

5. 瓊脂糖電泳檢測擴增效果。如果陰性對照有擴增產(chǎn)物或陽性對照無擴增產(chǎn)物，則說明實驗失敗，需要分析實驗失敗的原因。只有在陰性對照沒有擴增產(chǎn)物、陽性對照有 122bp 預期的擴增產(chǎn)物的情況下，才有必要分析樣品的實驗結(jié)果，如果有擴增產(chǎn)物則為陽性，如果無則為陰性。

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