蛇形隱孢子蟲PCR試劑盒

蛇形隱孢子蟲PCR試劑盒是群中等小的雙股 DNA 病毒，根據(jù)其理化性質(zhì)分 α、β、γ、未分類皰疹病毒四個亞科。皰疹病毒感染的宿主范圍廣泛，可感染人類和其他脊椎動物。在自然界廣泛存在，主要侵犯外胚層發(fā)育而成的組織，例如：皮膚、粘膜和神經(jīng)組織。

產(chǎn)品型號：50次
廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
更新時間：2020-07-29
訪問量：549

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詳細介紹

品牌	其他品牌	貨號	XY-0234
規(guī)格	50T	供貨周期	一周
主要用途	熒光定量PCR具有更高的擴增效率、更高的擴增靈敏度、更高的擴增特異性。	應用領域	醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁

蛇形隱孢子蟲PCR試劑盒

Cryptosporidium serpentis

產(chǎn)品及特點

蛇形隱孢子蟲（Cryptosporidium serpentis）感染發(fā)生在爬行動物，特別是蛇。本病以慢性感染為特征，伴有肥厚性胃炎。新生或幼齡動物，對隱孢子蟲呈高度易感性,但并非所有感染都引起急性發(fā)病。正常機體,常呈自限性或亞臨床感染或無癥狀感染。但在免疫功能低下或受損患者，其可迅速繁殖,使病情惡化,成為死因。因此快速準確診斷蛇形隱孢子蟲具有重要意義。為此本公司基于 PCR 原理開發(fā)了本產(chǎn)品，它具有下列特點：

1. 即開即用，用戶只需要提供寄生蟲 DNA 模板。

2. 根據(jù)蛇形隱孢子蟲保守序列設計的專一性引物，與其他微生物無交叉反應

3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次。

6. 本產(chǎn)品只能用于科研。

蛇形隱孢子蟲PCR試劑盒規(guī)格及成分

編號	成分	規(guī)格
試劑一	PCR MagicMix 3.	1 mL（紅蓋）
試劑二	超純水	1 mL（亮黃蓋）
試劑三	蛇形隱孢子蟲PCR 引物混合液	100 μL（白蓋）
試劑四	蛇形隱孢子蟲 PCR 陽性對照（1×10E8 拷貝/μL）	50 μL（黃蓋））
試劑五	天凈沙核酸釋放劑試用裝	20 次（1mL，綠蓋）
試劑六	使用手冊	1 份

運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置，不要污染其他試劑。

自備試劑樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容。

2. 如果有 N 個樣品，則需要做 N+2 個提取，包括一個樣品制備陽性對照和一個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水（取決于試劑盒要求的樣品起始量）中加 10μL 芽孢桿菌通用 PCR 陽性對照的 10000 倍稀釋液而得，樣品制備陰性對照是直接用水。提取結(jié)束后后得到模板 DNA 放冰上待用。

二、設置 PCR 反應（40μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性對照，故需要設置 N+4 個反應。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分：

成分	N+2個樣品管	PCR陰性對照	PCR陽性對照
PCR Magic Mix 3.0	各20 μL	20 μL	20 μL
蛇形隱孢子蟲PCR引物混合液	各2 μL	2 μL	2 μL
N+2 個樣品 DNA 模板	各 18 μL
樣品制備陰性對照（超純水）		18 μL	-
蛇形隱孢子蟲 PCR 的 1 千倍稀釋液	-		18 μL

4. 按下表設置 PCR 反應：

過程	溫度	時間
預變性	95℃	5 min
PCR反應（35個循環(huán)）	95℃	15 sec
	55℃	15 sec
	72℃	60 sec
后延伸	72℃	10 min

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在擴增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴增，否則實驗無效。對沒有擴增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。

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